MetaboSign – Technologie et équipements

Agilent Seahorse XF96

L’analyseur Agilent Seahorse XFe96 mesure en temps réel le taux de consommation d’oxygène (OCR) et le taux d’efflux de protons (PER) ou le taux d’acidification extracellulaire (ECAR) de toute type de cellules en culture. Ces mesures sont effectuées grâce à des sondes contenant des fluorophores sensibles à l’oxygène et aux protons et qui créent une micro-chambre transitoire à 200 microns au-dessus de la monocouche cellulaire. La mesure des variations de concentration d’oxygène dissous et de protons libres sont respectivement le reflet des deux principales voies du métabolisme cellulaire : la respiration mitochondriale et la glycolyse cytoplasmique.

De plus, un système intégré d’administration permet l’ajout séquentiel et automatique de jusqu’à quatre composés dans chaque puits, à des intervalles définis par l’utilisateur. Ce système permet de challenger les voies métaboliques, de tester l’action de molécules sur le métabolisme et de tester des molécules thérapeutiques…

Grâce à des drogues dirigées contre les éléments de la chaine respiratoire, le Seahorse permet notamment de mesurer la respiration basale et maximale des cellules, leur capacité de réserve et la respiration responsable de la production d’ATP (Mito Stress Test).

A l’aide de drogues qui défient la glycolyse, il permet aussi de mesurer la glycolyse basale, ainsi que la capacité et la réserve glycolytique.

Notre Seahorse XFe96 fonctionne avec des plaques de culture 96 puits et permet donc une très grande flexibilité quant au montage des différents protocoles en termes de répliquâtes, de traitements, de choix des molécules à injecter et du nombre de mesures au cours du temps.

Possibilité de combinaisons avec d’autres technologies :

·      Cytométrie spectrale : panel de 35 couleurs de marqueurs immunométaboliques (Plateforme de cytométrie de NeuroDiderot) en cours de construction

·      RMN métabolomiques : analyse de métabolites dans le plasma ou dans les surnageants de culture ou intracellulaire (Metabo Paris Santé) https://biomedicale.u-paris.fr/rmn-metabo-paris-sante/