Activités

Préparation des cellules et des tissus:

• Coupe des échantillons
• Colorations, immunomarquage chromogénique
• Immunomarquage fluorescent multiple

Imagerie:

• Imagerie à champ large, imagerie confocale, imagerie calcique, imagerie bi-photonique
• Reconstruction mosaïque, reconstruction 3D
• Analyse d’image : segmentation, comptage, colocalisation, analyses statistiques, analyse en 3D

Installations

Les installation de la plateforme DHIM sont situées à l’Hôpital Pédiatrique Robert Debré à Paris, dans le laboratoire NeuroDiderot de l’Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (Inserm) et de l’Université Paris Cité.

Équipements

Histologie et immunohistochimie :

• Automate de déshydratation pour le traitement des tissus avant l’enrobage en paraffine
• Station d’enrobage qui permet le moulage des échantillons dans un moule avec la paraffine
• Automate de coloration, pour effectuer la coloration au violet de crésyl de manière automatisée avec colleuse de lamelles pour le montage automatique des lames
• Microtomes pour la coupe en paraffine
• Cryostats pour la coupe en congélation
• Imprimante de lame
• Automate d’immunohistochimie afin de réaliser tout type d’immunohistochimie et d’hybridation in situ de manière automatisée

Microscopie :

• Deux microscopes optiques
• Deux stéréomicroscopes
• Un microscope de stéréologie avec Stereo Investigator
• Trois microscopes à épifluorescence
• Un microscope ApoTome
  • Statif droit Axio Imager.Z1
• Un microscope Nikon équipé pour la microscopie TIRF et l’imagerie calcique
  • LUSU 488 nm et 561 nm pour TIRD
  • Lambda DG-4 / DG-5 pour calcium
  • Statif inversé Eclipse Ti-E
• Un microscope confocal Leica TCS SP8
  • Lasers : Diode 405 nm, Ar 458/476/488/496/514 nm, DPSS 561 nm, HeNe 633 nm
  • Scanner résonnant 8 kHz
  • 2 PMTs, 1 détecteur HyD
  • Statif inversé DMI6000B CS
• Un microscope bi-photonique Zeiss LSM 880 NLO
  • Lasers bi-photoniques Chameleon Discovery avec raie fixe à 1040 nm et raie variable de 660 à 1320 nm
  • Lasers monophotoniques 458/488/514 nm, 561 nm et 633 nm
  • Détecteurs NDD BIG2, 3 PMTs
  • Statif droit Axio Examiner.Z1
• Un stéréo-microscope Zeiss Stemi 508 trinoculaire

Analyse d’image

• Une station de travail dédiée à l’analyse d’images 3D avec Imaris 10.0 for Core Facilities, avec les logiciels d’analyse d’image ImageJ et QuPath et les logiciels de visualisation Nikon, Leica et Zeiss

Services proposés

La plateforme DHIM met à disposition en interne tous les appareils après une formation de l’utilisateur. La plateforme propose également la prestation de service, avec la prise en charge d’un projet de recherche ou bien un projet collaboratif en aidant et accompagnant de la mise en place ou l’optimisation d’un protocole expérimentale, à l’analyse des résultats.